诺丽原液对老龄小鼠抗氧化功能影响的实验研究

2017-06-12 14:00:57

· 抗氧化活性· 诺丽的保健功效国际最新研究进展论文集


食品工业科技. 2011, 32(7): 392-406.


诺丽原液对老龄小鼠抗氧化功能影响的实验研究


诺丽原液对老龄小鼠抗氧化功能影响的实验研究


张建军,王林元,欧丽娜,苗春平,徐媛,刘妍,金磊,钱丽丽,龙锐


(北京中医药大学,北京100029

摘要: 目的:探讨诺丽原液对老龄小鼠抗氧化功能的影响。方法:老龄动物模型法,采用51030mL/kg·bw 剂量的诺丽原液给老龄小鼠灌胃,于末次给药后,分别测定血中丙二醛(MDA)的含量和肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力。结果:与空白老龄对照组比较,诺丽果汁51030mL/kg·bw剂量组能显著提高肝组织中SODGSH-Px活力,降低血中过氧化脂质MDA含量。结论:诺丽果汁具有抗氧化功能。


关键词:诺丽原液,老龄小鼠,抗氧化功能


诺丽果为茜草科巴戟天属植物海巴戟天(Morinda citrifolia L.)的成熟果实。海巴戟天是一种小型热带长青植物,生长在海拔1300英尺以下的沿海地区,树干大,挺拔,直立;叶片椭圆形,亮绿色;花白色,管状;果实为聚合果,长卵形或球形,形似菠萝,略小,成熟时呈白色或黄色。诺丽果在热带地区有悠久的食用历史,在东南亚、印度、澳洲、南太平洋岛、中美洲、加勒比地区、非洲等热带国家及地区均有食用历史和文献记载。南太平洋岛当地土著人称诺丽“NONI”,第二次世界大战时留守在南太平洋的美国驻军,以食用诺丽果来增强体力,预防疾病。我国《海南植物志》记载海巴戟天的果实诺丽果可食用[1],目前诺丽果浆在我国作为新资源食品应用。


1材料与方法

1.1材料与仪器


实验动物清洁级ICR 10月龄小鼠40只,体重(45 ± 5g,由北京维通利华实验动物中心提供,动物合格证号:SCKX(京2007-0001);溪地阳光诺丽果汁来源于溪地阳光诺丽饮料(中国)有限公司,为棕褐色液体;丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测试盒由南京建成生物工程研究所提供。


动物台秤常熟双杰测试仪器厂;恒温水浴箱 北京长风仪器仪表公司;752 型分光光度计 上海分析仪器厂;离心机 长沙平凡仪器仪表有限公司。


1.2实验方法

实验前,小鼠称重后眼眶取血,分离血清,按试剂盒说明书测定血清中的MDA含量。按MDA水平将小鼠分为老龄对照组和低、中、高(51030mL/kg·bw 剂量的诺丽果汁给老龄小鼠灌胃)三个剂量组。实验时按所设剂量组进行灌胃给药,连续30d


1.2.1观察指标及检测方法


1.2.1.1一般体征观察实验期间观察小鼠的精神、活动和毛色。


1.2.1.2血清脂质过氧化指标的测定末次给药后小鼠摘眼球取血,置于试管中,离心(3000r /min10min),分离血清测MDA含量。MDA含量测定采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法。


1.2.2.3 组织匀浆抗氧化酶活力的测定小鼠摘眼球取血后处死小鼠,立即取新鲜肝脏组织块(0.21g),除去血液,滤纸拭干,称重,加入9倍重量的冷生理盐水,用组织匀浆机制成10%匀浆液,检测SODGSH-Px活力。SOD 活力测定采用邻苯三酚氧化法,GSH-Px活力测定采用二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)法。


1.2.2实验数据统计所测定指标均采用均数±标准差( ± s)表示,使用SPSS13.0 软件中的方差分析(ANOVA)进行检验,P0.05表示差异有显著性。


2结果与分析


2.1一般体征观察结果

给予不同剂量的诺丽果汁30d后,各剂量组尤其高、中剂量组反应灵敏、行动灵活、毛色光亮;老龄对照组反应迟滞、行动缓慢、毛色粗糙。


2.2诺丽原液对老龄小鼠血清过氧化脂质的影响

给予不同剂量的诺丽果汁30d后,各剂量组与对照组比较血清MDA含量降低,差异有显著性,其中高剂量组含量最低(P0.001),见表1


1 诺丽原液对老龄小鼠血清MDA含量的影响( ± s

剂量组

动物数()

MDA 含量( nmol/mL)

P

对照

10

13.14 ± 2.77

-

10

10.05 ± 3.61**

0.007

10

9.03 ± 2.11***

0.001

10

61 ± 1.35***

0.001

注:与对照组比较,**P0.01,***P0.001;表2、表3同。

2.3 诺丽原液对老龄小鼠肝组织匀浆中超氧化物歧化酶( SOD) 活力的影响

给予不同剂量的诺丽果汁30d后,各剂量组与对照组比较肝组织中SOD活力升高,差异皆有显著性(P0.001),见表2


2 诺丽原液对老龄小鼠肝组织中SOD 活力的影响( ± s

剂量组

动物数()

MDA 含量(nmol/mL

P

对照

10

92.80 ± 9.50

-

10

134.90 ± 14.08***

0.001

10

136.64 ± 13.16***

0.001

10

142.51 ± 15.84***

0.001

2.4诺丽果汁对老龄小鼠肝组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响

给予不同剂量的诺丽原液30d后,各剂量组与对照组比较肝组织中GSH-Px活力升高,差异皆有显著性(P0.001=,见表3


3 诺丽原液对老龄小鼠肝组织中GSH-Px活力的影响( ± s

剂量组

动物数()

MDA 含量(nmol/mL

P

对照

10

129.50 ± 21.14

-

10

170.99 ± 25.07***

0.001

10

224.25 ± 26.18***

0.001

10

270.17 ± 29.93***

0.001


3讨论


衰老是机体各种生化反应的综合表现,是体内外许多因素(环境污染、精神紧张、遗传等)共同作用的结果[2]。而对于衰老产生的确切机制,迄今尚未明了。多年来,国内外学者相继提出了十余种有关衰老的理论学说,其中普遍受到认同的衰老机制为自由基学说(HARMAN),即人体在正常的生理代谢过程中会产生少量的含氧自由基[3],如超氧阴离子(O2-·)、羟自由基(·OH)、单线态氧(1O2)和过氧化氢(H2O2)等,这些物质会对细胞产生毒性,使细胞膜、组织、酶及基因受损,从而引起机体多种疾病的发生和衰老。而机体内的防御机制(抗氧化酶或抗氧化剂)会及时将其清除,以维持氧自由基的代谢平衡,因此一般不会对细胞、组织产生损伤。但随着年龄的增长或在某些病理状态下,体内抗氧化酶SODGSH-Px活性下降,过多的氧自由基不能被及时清除而堆积在细胞内,致使它们迅速与机体内的一些生物大分子,如蛋白质、核酸、氨基酸、脂质等发生反应,生成氧化物或过氧化物,而MDA正是自由基攻击生物体的降解物,MDA生成的多少可间接反映组织的损伤程度[4]


本实验通过研究给老龄小鼠灌胃诺丽原液后,其过氧化脂质MDA含量和抗氧化酶SODGSH-Px活性的变化,考察诺丽果汁对老龄小鼠的抗氧化作用。实验中,诺丽果汁51030mL/kg·bw剂量组能显著提高肝组织中SODGSH-Px活力,并且能明显降低血清中过氧化脂质MDA含量。SODGSH-Px活力提高反映了机体清除自由基能力的增强;同时,MDA含量减少揭示机体受自由基攻击程度降低。因而,研究结果显示,服用诺丽原液后,机体的抗氧化能力增强,也就是机体自身防御体系的功能加强,从而减少疾病的产生及衰老的形成,以达到其抗衰老的保健目的。